利用显微镜进行细胞观察>
显微镜进行两栖动物血细胞培养的染色体观察数显微镜两栖动物血细胞培养的染色体观察数一、实验目的: 1、掌握两栖动物外周血淋巴细胞培养的基本方法。 2、对细胞培养获得的染色体进行观察。 3、提高学生实验素质,奥林巴斯显微镜可以培养学生学研究和创造性能力。 二、实验条件: 1、材...
1、掌握两栖动物外周血淋巴细胞培养的基本方法。
2、对细胞培养获得的染色体进行观察。
3、提高学生实验素质,培养学生学研究和创造性能力。
2、仪器:光学显微镜、锅、冰冻玻片、(10ml) 、注射器、针头(5号)、、酒精灯、微孔滤器、滤膜、、解剖盘、解剖剪、镊子、等。
3、药品:素钠、RPMT1640培养基、植物血凝素( PHA )、水仙素、nbsp;KCl、固定液(甲醇:冰醋酸=3:1)、Giemsa染液、磷酸缓冲液(nbsp;等。
4、培养基:(1)RPMI1640培养基 4ml
(2)小牛1ml
(3)双抗(青霉素和链霉素)各 nbsp;
(青霉素和链霉素浓度20万U/ml)
(4) PHA nbsp;(浓度1mg/ml) 用5%滤灭菌。
1、选择染色体清晰,分散好的中期分裂相,计数染色体,通过显微镜摄像头进行显微摄影、并打印出照片。
2、分析成功或失败的原因。
3、PHA的作用是什么?本次实验为什么低渗温度选择26℃,而在小鼠骨髓细胞染色体制片中低渗温度选择在38 ℃?
4、写出实验报告。
血细胞培养是制备人和珍稀、濒危动物等染色体标本的主要方法之一,动物外周血淋巴细胞一般情况下不进行分裂。如果在培养液中加入一种强有力的有丝分裂原----植物血凝素(PHA),这种淋巴细胞受到刺激可转化为淋巴母细胞,进入有丝分裂A>
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